根据杭州市农业局文件[2009]35号文件精神，在哈尔滨学习了10多天，主要目的是学习他们的先进技术。虽然时间不长，但是收获还可以。

哈尔滨兽医研究所始建于1948年6月，隶属于中国农业科学院，现所区占地面积6.96万平方米，近郊还有一个占地153.29万平方米的试验动物基地。哈尔滨兽医研究所编制566人。现有中国工程院院士1人、百千万人才工程2人、博士研究生导师17人，目前在读研究生235人。

科研机构主要由兽医生物技术国家重点实验室、动物流感研究室、禽传染病研究室、猪传染病研究室等9个部门组成，主要任务是根据国家战略需求、瞄准国际科学发展前沿、以知识创新为本，承担动物传染病防治相关领域全局性、基础性、关键性、方向性的重大科技项目，解决其相关的重大科技问题，带动我国动物疫病防制理论和技术的发展与进步。下属的维科公司的主要任务是针对我国重大疫病的防制需求，开发有效、实用、达到国际先进水平和标准的动物用生物制品。建所以来，共获得各类科技成果298项，其中国家发明一等奖2项，二等奖2项、获新兽药证书26项，专利13项，有50余项科研成果达到国际先进水平，先后研制出140多种诊断试剂和疫（菌）苗直接应用于动物疫病防制。

2009年6月8日-19日到哈尔滨兽医研究所学习12天，在学习期间主要学习了当前兽医检测技术和当前禽流感疫苗的研究进展，蛋白质的酵母表达方面的内容。在此期间，还听取了研究生毕业论文答辩，涉及内容非常广泛，有可视化芯片、仙台病毒、禽流感腺病毒疫苗、高致病性蓝耳病、猪流感病毒的反向遗传学、马传贫逆向突变和其它基础研究方面。还参加了教育部“长江学者”特聘教授、华南农业大学寄生虫学研究室主任、博士生导师朱兴全教授的“写作及发表SCI论文的技巧”讲座。整个学习过程中深深感受到了该所浓厚的学术氛围、高超的学术技巧、默默无闻的献身精神、严谨的治学态度。通过学习对当前猪瘟的荧光定量检测、检测技术的发展趋势等方面增长了认识，开阔了视野。

    在学习期间掌握了另外一种荧光定量PCR仪器的使用方法，学习了猪瘟野毒的荧光定量鉴定方法。

    由于哈尔滨兽医研究所是研究单位，技术上相对比较先进，在试验过程中，他们采用了一些新方法，有些在书上看到过，有的还闻所未闻。比如使用Bio-Rad 的荧光定量PCR仪器，以前只是在网站上看到过使用方法，没有用过。超滤方法，在教科书上都看到过了，但没有实际操作过，这次学习期间使用了微型超滤柱分离浓缩蛋白。而像SDS-PAGE电泳后的快速脱色方法。一般是采用专门的脱色液进行脱色，而他们使用微波炉加热的方法既快速又省试剂。我觉得在进一步验证后值得推广应用。

     2 基本掌握了酵母表达的整个操作过程。

    酵母表达周期长，试验操作比大肠杆菌更加复杂，需要时间更长，主要原因一是酵母本身比较复杂，而是生长缓慢，需要2-3天才能长出1.5mm左右的菌落，而大肠杆菌只需要15个小时就够了。如果是首次操作酵母菌，大约需要4个月的时间才能完成从设计引物到表达出蛋白并且鉴定出来整个试验。

本次将转化的酵母菌放在培养基中，培养2天，待其OD600值在1左右，添加甲醇至1%，诱导表达，在诱导1天、2天、3天时分别取出部分细菌，离心后取上清，因为本次表达使用分泌型表达，表达产物应该在培养液中。在试验过程中并不顺利，首先采取超滤柱浓缩的方法，结果因为酵母菌没离心彻底，残留的部分酵母菌堵塞了超滤柱。后采取TCA沉淀方法，对上清加以浓缩。

    哈尔滨兽医研究所是国家级研究单位，在技术上处于世界上先进行列。目前采用了许多新技术。拿检测技术来说，在2000年以前，基本上只有血凝等二级血清学检测方法，目前已经ELISA技术，胶体金技术已经充分发展。PCR、荧光定量PCR、基因芯片等技术在短短10年左右的时间里逐渐发展并日益成熟。目前荧光定量正逐步普及，基因芯片正处于研究阶段。这次在哈尔滨已经有研究生毕业论文答辩在做这方面的研究。估计在不远的将来会有商品化的检测芯片出现。以后有机会多同这样的单位交流可能对知识的更新很有帮助。

    全所地方不是很大，但是汇集了国家级甚至世界级别的专家，在禽流感处于国际领先、猪蓝耳病、马传贫等疾病方面都处于国内领先地位。全所目前分为禽流感、猪病组、马病组等多个研究小组，陈化兰因为研究禽流感疫苗等方面处于国际领先地位，在国内外享有较高的声望，她所在的研究小组拥有P3实验室，是国家禽流感参考实验室，目前国内的禽流感的最后确诊是在此进行。他们进行的禽流感研究已经构建了新城疫-禽流感重组苗，鸡痘--禽流感重组苗，而且在人用禽流感研究方面也将利用反向基因遗传拯救构建了人用禽流感疫苗。

    研究所不像学校，有各种文体娱乐设施和场所。研究生们基本上整天在做试验，每天从早上8点到晚上10点试验大楼始终亮着灯光，节假日实验室也都在运转。就像一个导师说的，“要想做出点成绩就要拼命干，没日没夜的干”。我在那里一下子很不习惯，整天在实验室里，感觉就像把一个人用飞机空降到了周围没有人烟与外界隔绝的大沙漠里。

    现在每年毕业的研究生有40多名，在哈尔滨期间，研究生答辩比较多。他们的答辩基本集中在1-2周时间内。请来的专家有夏咸柱院士，谢庆阁等全国资深的知名研究员，也有沈阳的专家教授以及本所的研究生导师。在答辩过程中，专家提问后，学生有问题也可以提问。专家们畅所欲言，有学术方面的，有经费方面的，有侧重应用方面的。提的意见一般比较精辟，一般学生没想到或者没有注意到的地方。比如在学生答辩蛋白表达方面，有的评委说你们导师很有钱，为什么不直接去合成肽，现在价格已经很便宜了。导师当然有自己的见解，说直接合成一条肽链是便宜，但是太短，免疫原性不好，还要偶联，这样价格就贵了。

    虽然该院在国内外已经比较出名，但是还经常请各地专家同行到所里讲课交流。在学习期间，他们请了教育部“长江学者”特聘教授、华南农业大学寄生虫学研究室主任、博士生导师朱兴全教授作了“写作及发表SCI论文的技巧”讲座。当然SCI论文对于像哈兽研这样的研究机构是很重要的。

    每年国家划拨有专门的仪器设备经费，主要购买贵重的先进的仪器。比如流式细胞仪、荧光定量PCR仪器（已有2台），高速大容量离心机（已有4台），红外扫描仪，超声波粉碎仪、细胞电转仪，这些设备全所共享。纯水的供应是全所统一供应。每天早上上班后开始供应。其它常见设备如低温摇床等各个研究小组自己配备。有专门的实验动物房，可以饲养猪、鸡、马、牛、小白鼠等动物。我们目前的仪器没有什么共享的，虽然属于同一个兽医局。图书等其它方面作为一个整体考虑可能更利于充分发挥有限的资源的效率。

    有专门的人员负责试管、玻璃瓶等的清洗、消毒。这样总体节省了劳动力成本。由于人员较多实验室房间有限，这样做也增加了实验室的可利用面积。实验人员可以集中精力做研究，把技术含量不高的部分由普通工人去做，分工比较合理。仪器设备有专人保养，制定了详细的仪器设备保养工作计划，规定了每日清洗、每周维护保养、每月保养等，使用人员自觉的按照使用方法使用，因此使用了20多年的设备至今还能正常运行，而且无任何的损伤痕迹，延长其使用寿命，节约了成本。

     总之这次学习，基本上达到了学习先进技术等预期的目的，增进了了解，开阔了眼界。